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                          ELISA試劑盒 > > 雞ELISA試劑盒
                          雞白細胞介素6 ELISA試劑盒
                          雞白細胞介素6 ELISA試劑盒
                          品名︰
                          雞白細胞介素6 ELISA試劑盒
                          貨號︰
                          F7040-B
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                          試劑盒使用說明書

                          本試劑盒僅供研究使用。

                          檢測範圍︰ 96T

                          1 pg/mL - 32 pg/mL

                          使用目的︰

                          本試劑盒用于測定雞血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中白細胞介素6(IL-6)的含量。

                          實驗原理

                          本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中雞白細胞介素6(IL-6)水平。用純化的雞白細胞介素6(IL-6)捕獲抗體包被 裝澹 瞥曬滔囁固澹 壞奈 字幸來渭尤爰Π紫赴樗(IL-6),再與HRP標記的檢測抗體結合,形成抗體-抗原-黴標抗體復合物,經過徹底洗滌後加底物TMB顯色。TMB在HRP黴的催化下轉化成藍色,並在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雞白細胞介素6(IL-6)呈喙亍S妹副暌竊50nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中雞白細胞介素6(IL-6)含量。

                           

                          試劑盒組成

                          試劑盒組成

                          48孔配置

                          96孔配置

                          保存

                          說明書

                          1份

                          1份

                           

                          封板膜

                          2片

                          2片

                           

                          密封袋

                          1個

                          1個

                           

                          黴標包被板

                          1×48

                          1×96

                          2-8℃保存

                          標準品

                          1. ×6管
                          2. ×6管
                           

                          2-8℃保存

                          黴標試劑

                          5 ml×1瓶

                          10 ml×1瓶

                          2-8℃保存

                          樣品稀釋液

                          3 ml×1瓶

                          6 ml×1瓶

                          2-8℃保存

                          顯色劑A液

                          3 ml×1瓶

                          6 ml×1瓶

                          2-8℃保存

                          顯色劑B液

                          3 ml×1瓶

                          6 ml×1瓶

                          2-8℃保存

                          終止液

                          3 ml×1瓶

                          6 ml×1瓶

                          2-8℃保存

                          20×濃縮洗滌液

                          15ml×1瓶

                          25ml×1瓶

                          2-8℃保存

                          注︰標準品濃度依次為︰32、16、8、4、2、0 pg/mL.

                          樣本處理及要求

                          1. 血清︰室溫血液自然凝固10-20分櫻 冑0分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉澱,應再次離心。
                          2. 血漿︰應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘後,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉澱形成,應該再次離心。
                          3. 尿液︰用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉澱形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
                          4. 細胞培養上清︰檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞並放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成,應再次離心。
                          5. 組織標本︰切割標本後,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅 潿潮4奼贛謾1甌救諢 筧然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝後一份待檢測,其余冷凍備用。
                          6. 標本采集後盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
                          7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物黴的(HRP)活性。

                           

                          操作步驟

                          1. 標準品的加樣︰設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;。
                          2. 加樣︰分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及黴標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在黴標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然後再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于黴標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
                          3. 加黴︰每孔加入黴標試劑100μl,空白孔除外。
                          4. 溫育︰用封板膜封板後置37℃溫育60分鐘。
                          5. 配液︰將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋後備用。
                          6. 洗滌︰小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒後棄去,如此重復5次,拍干。
                          7. 顯色︰每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
                          8. 終止︰每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
                          9. 測定︰以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液後15分鐘以內進行。

                          操作程序總結︰

                          計算︰

                          以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,   

                          在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD     

                          值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋      

                          倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標      

                          準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值      

                          代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋      

                          倍數,即為樣品的實際濃度。 

                          注意事項︰

                          1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘後方可使用,黴標包被板開封後如未用完,板條應裝入密封袋中保存。樣本在使用前也要在室溫平衡60分鐘。

                          2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

                          3.各步加樣均應使用加樣器,並經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

                          4.請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)後再測定,計算時請最後乘以總稀釋倍數(×n×5)。

                          5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

                          6.底物請避光保存。

                          7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以黴標儀讀數為準.

                          8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

                          9.本試劑不同批號組分不得混用。

                          1. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

                          保存條件及有效期

                          1.試劑盒保存︰;2-8℃。

                          2.有效期︰6個月

                          • 地址︰上海市閔行區新駿環路188號19號樓309室 郵編︰201114 熱線:021-62215581 郵箱:shylsw@163.com 聯系人︰楊老師
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